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細胞鈣離子檢測實驗

簡要描述:細胞鈣離子檢測實驗是伊萊博生物的基礎服務項目之一,由經驗豐富的實驗人員操作完成。

  • 更新時間:2025-05-14
  • 廠商性質:代理商
  • 訪  問  量:1024

詳細介紹

品牌其他品牌應用領域醫療衛生,生物產業

常用檢測方法

1. 熒光探針法

  • ?原理?:使用鈣離子敏感熒光探針(如Fluo-3、Fluo-4)與Ca2?結合后產生熒光信號變化

  • ?操作流程?:

    1. 探針負載:將細胞與熒光探針共孵育(通常30-60分鐘)

    2. 洗滌去除多余探針

    3. 實時監測熒光強度變化(激發/發射波長約488/525nm)

  • ?優勢?:靈敏度高、可實時動態監測

2. 流式細胞術

  • ?應用?:高通量分析群體細胞Ca2?濃度分布

  • ?特點?:

    • 結合熒光探針使用

    • 可同時檢測其他參數(如細胞周期)

3. 共聚焦顯微鏡技術

  • ?優勢?:亞細胞分辨率,可定位Ca2?信號空間分布

  • ?應用?:研究局部鈣信號(如突觸小體鈣震蕩)

實驗設計要點

樣本制備

  • ?細胞狀態?:建議使用對數生長期細胞(70-80%融合度)

  • ?對照設置?:

    • 陰性對照(無探針組)

    • 陽性對照(鈣離子載體處理組)

參數優化

  • ?探針濃度?:避免過度負載導致的細胞毒性

  • ?檢測時間?:根據信號動態范圍確定(通常5-30分鐘)

  • ?溫度控制?:維持37℃恒溫環境

數據分析

信號處理

  • ?基線校正?:扣除背景熒光

  • ?標準化表達?:ΔF/F?=(F-F?)/F?

  • ?動力學參數?:

    • 峰值幅度

    • 上升/下降時間常數

注意事項

  1. ?避光操作?:熒光探針易光漂白

  2. ?鈣緩沖系統?:控制胞外Ca2?濃度

  3. ?多參數驗證?:建議結合電生理或分子生物學方法

  4. ?設備校準?:定期進行熒光強度標定



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