簡要描述:冰凍切片尼氏染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)是伊萊博生物的基礎(chǔ)服務(wù)項(xiàng)目之一,由經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員操作完成。
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?樣本準(zhǔn)備?
新鮮組織速凍:-25℃冷凍箱速凍3-5分鐘,切8μm厚度切片
。
直接固定:切片經(jīng)4%多聚甲醛或95%乙醇固定10分鐘,蒸餾水沖洗
。
?染色步驟?
?焦油紫/硫堇染色?:浸入1%焦油紫或硫堇染液10分鐘至1小時(shí)(根據(jù)組織類型調(diào)整)
。
?分色?:70%酒精分化數(shù)秒至數(shù)分鐘,顯微鏡下控制至背景透明、Nissl小體清晰
。
?脫水封片?
梯度酒精脫水(70%→80%→95%→無水乙醇),二甲苯透明,中性樹膠封固
。
?染色控制?:分色是核心步驟,需顯微鏡下實(shí)時(shí)觀察避免過度脫色
。
?結(jié)果判讀?:
?陽性信號(hào)?:Nissl小體呈深紫色(神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi)顆粒狀結(jié)構(gòu))。
?背景?:應(yīng)為無色或淺灰色,否則需延長分色時(shí)間
。
?優(yōu)勢(shì)?:冰凍切片保留更多脂溶性成分,適合快速檢測(cè)
。
?局限性?:組織形態(tài)略腫脹,需經(jīng)驗(yàn)判讀
。
如需長期保存,建議轉(zhuǎn)換為石蠟切片(需避免解凍后固定)
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