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?高爾基染色法?
固定:新鮮腦組織用10%甲醛或混合液(重鉻酸鉀+甲醛)固定24小時以上
。
鍍銀:3.5%重鉻酸鉀處理3-7天→AgNO?溶液避光浸染2-6天
。
切片:火棉膠包埋后切20-100μm厚片,二甲苯透明封片
。
?原理?:通過重鉻酸鉀和AgNO?反應沉積金屬銀,使神經元胞體、樹突(含樹突棘)及軸突呈黑色
。
?步驟?:
?Bielschowsky改良法?
?應用?:顯示神經纖維瘤、軸突等,陽性信號為深棕色/黑色
。
?關鍵?:銀溶液浸染后需還原劑處理,避免非特異性沉積
。
?質量控制?:
鍍銀時間需優化,過短導致背景染色,過長致信號缺失
。
分色步驟需顯微鏡下監控,確保神經元與背景對比清晰
。
?樣本處理?:
新鮮組織固定后需充分沖洗,避免殘留固定劑干擾銀染
。
?陽性結構?:
高爾基法:神經元全形態(樹突棘、軸突分支)
。
Cajal銀染:神經原纖維網狀排列,突觸終扣呈環狀
。
?常見問題?:
背景過深:需調整AgNO?濃度或縮短染色時間
。
?神經環路研究?:如小鼠后頂葉皮層神經元投射分析
。
?病理診斷?:鑒別神經系統腫瘤(如神經纖維瘤)
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