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細胞周期檢測技術

簡要描述：細胞周期檢測技術：細胞周期是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程，分為間期與分烈期兩個階段。細胞周期反應了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法，但它不能代表細胞群體的周期，故現多采用其他方法測群體周期測定細胞周期的方法很多，常用的是PI滲入測定細胞周期。

更新時間：2025-06-13
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細胞周期檢測技術實驗步驟

實驗共分以下4個主要步驟:

1.細胞鋪盤

HeLa S3細胞，密度為80%左右分盤，使鋪盤密度在50%左右，為滿足流式細胞儀上機要求，細胞數目需大于1x10°/組。

2.細胞同步化處理:

a)加入終濃度2mM的Thymidine同步化18h

b) 用溫育的PBS洗4次，更換新鮮培養基，培養9h

c) 再加入2mM Thymidine再次同步化18h后

3.樣品收集 ;

a) 分別收取釋放2h(S期)，6h(G2/M期)和12h(G1期)細胞樣品

b) 每個樣品收取都使用預冷的PBS洗滌4次，1000g離心5min，棄上清

c) 100uL PBS重懸沉淀，吸取出細胞懸液于移液器中，于移去細胞的管中加入900uL預冷的70%乙醇，漩渦振蕩器震蕩中滴

入細胞懸液。

d)4℃固定一小時或更長時間。

e)1500rmp，離心10min，去固定液。

f)細胞染色液配制:50xRNaseA母液:50xPI母液:PBS=20:20:960;RNaseA母液濃度1mg/mL，工作濃度20ug/mL;PI母液濃度2.5mg/mL，工作濃度50ug/mL。

g) 細胞37度染色1h。根據細胞量，加入一定體積的細胞染色液(1~1.5mL)重懸，使上機時細胞通過率為200~350Cell/s,染色液不可過多或過少，過多則細胞密度過低上機速度嚴重不足，過少則導致細胞粘結。

h) 300目篩網過濾至流式管中。

4.上機檢測;

流式細胞儀上機檢測，計數50000個細胞。

5.同步化數據分析

細胞周期檢測技術

我們擁有專業的實驗室、精良的實驗設備和經驗豐富的科研技術人員。技術團隊包括研究員（博士后）2人，助理研究員（博士）4人，核心研究員（碩士）15人，主要致力于基因組學、轉錄組學、蛋白質組學、代謝組學、生物化學、病理檢測、基因檢測等技術在科研中的應用與推廣。通過高度細分、較好的的服務平臺，為廣大客戶提供了完善的技術解決方案和服務。目前，及，涉及臨床醫學、腫瘤生物學、免疫學、細胞生物學、分子生物學等生命科學、醫學等諸多領域。

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