動(dòng)物小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞的種植

簡(jiǎn)要描述：動(dòng)物小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞的種植：在無菌的條件下分離并取出小鼠的脛骨和股骨，注意不要打破骨頭。隨后放入含有75%酒精的細(xì)胞培養(yǎng)皿中。

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動(dòng)物小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞的種植所用動(dòng)物

C57小鼠，雌性， 10周，通過頸椎脫臼處死小鼠，浸入75%乙醇浸泡5分鐘，轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。

動(dòng)物小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞的種植方法

打開皮膚，暴露、收集股骨，無菌狀態(tài)下移除附著的肌肉和組織。

轉(zhuǎn)移股骨至預(yù)冷含雙抗的PBS中浸泡，洗滌三次，冰上操作。

切斷股骨骨骺，使用3ml 種植液，1ml注射器沖洗，沖洗液由棕色變成粉紅色即可。

收集沖洗液，計(jì)數(shù)。

用種植液（DMEM+10%FBS+20%L929細(xì)胞上清液+1%雙抗）稀釋細(xì)胞，種在3個(gè)10cm皿中，37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

培養(yǎng)6天的巨噬細(xì)胞。

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