動物組織石蠟包埋和切片實驗技術服務

簡要描述：石蠟包埋能夠保護樣本、固定組織結構、促進切片和染色等

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組織石蠟包埋和切片：

1、切取組織，浸泡在4％用pH7.4 BS配成的甲醛固定劑中，室溫24小時。

附：4％甲醛固定劑（5ml）：4.5ml 1×PBS(pH7.4)+0.5ml甲醛

2、倒掉甲醛固定劑，加pH7.4 BS,每隔8小時更換一次，4℃保存，換液共3天。

3、打開烘箱，調溫至62℃，融石蠟。

4、酒精梯度脫水（30％、50％、70％、80％、90％、95%、100％×2），隔30分鐘更換一次。

5、50％酒精＋50％二甲苯30分鐘（過渡步驟）。

6、100％二甲苯，時刻觀察組織塊至透明。

7、放入烘箱中已經預融的50％石蠟＋50％二甲苯中，30分鐘。

8、100％石蠟兩遍，每次2小時。(若石蠟浸潤不夠，仍有二甲苯，則包埋后的石蠟塊較脆，易分層、斷裂。)

9、100％石蠟紙盒內凝固（先用蠟打底，再放入組織塊，澆上蠟包埋，放入4℃冰箱或水中冷凝，標明組織塊放入方向），4℃存放備用。

10、修塊。

11、融化石蠟抹于塊底，貼在木塊上，壓實。

12、切片（5－10μm）,將切片平展于平板上，光面朝上。

13、將光面朝下，將石蠟薄切片放于水面上（水溫40℃），使其伸展。（時間勿太長）。

14、將石蠟薄片貼在預先處理好的玻片上。

15、40℃烘烤過夜。

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