成年小鼠關節軟骨細胞原代培養

簡要描述：成年小鼠關節軟骨細胞原代培養是伊萊博生物的服務項目之一，由經驗豐富的實驗人員操作完成。

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1. C57小鼠，8-10周，通過頸椎脫位處死，浸入75%乙醇浸泡5分鐘，轉移到通風柜中的解剖盤中。

2. 使用ykj和nz，使髖關節脫臼，保持股骨頭完整。

3. 用zxq去除每個股骨頭的軟骨帽，將組織放入含2%雙抗的PBS中。

4. 用冰冷的含2%雙抗的PBS清洗2-3遍，將關節軟骨小心移到2ml離心管中。

5. 用ykj將軟骨帽剪成約1mm3的碎片，加入3ml預熱的Collagenase D（1.5mg/ml）。

6. 放入37℃、80rpm的搖床中進行第一次消化，時間2h 。

7. 第一次消化結束后，加入含血清的培養基終止消化，40um的細胞篩過濾后，離心1500rpm，2min。

8. 沉淀用DMEMwq培養基重懸，計數，種植在24孔板中。

9. 在未消化的組織中加入3ml預熱的Collagenase D，放入37℃、80rpm的搖床中進行第二次消化，時間2h，然后收集細胞。

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